产品货号：
JN0023
中文名称：
热启动Taq DNA聚合酶
英文名称：
HotStart Taq DNA Polymerase
产品规格：
250U|250U×5
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是Taq酶经特殊工艺处理后的制品，经处理后的Taq酶在加热至高温前，其聚合酶活性被抑制，从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。本制品适用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量（>60%），有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组扩增检测。
- 高特异性PCR反应；
- 复杂模板扩增；
- Multiplex PCR；
- 基因组扩增检测；
- 荧光定量PCR。
- 简便：与目前通用的最有效的热启动酶反应条件一致，不需要改变PCR程序。
- 高效：有效减少了杂带及拖带产生，从而实现高特异性的PCR。
- 灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
热激活后，在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTPs的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
| 组分 | 250U | 250U×5 |
| 热启动Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 50μL | 50μL×5 |
| 5×HS Taq Buffer with Mg2+ | 1mL×2 | 1mL×10 |
| dNTPs (10mM each) | 200μL | 200μL×5 |
保存：-20℃
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
使用本试剂扩增得到的PCR产物3'端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中。
- 2mM Mg2+可以满足绝大多数PCR扩增，对于某些PCR，为了保证较好的扩增，可调节为2～4mM。
- 体系中加入推荐的酶量，可以满足大多数PCR扩增，对于某些PCR，为了得到较好的扩增，可适当增加酶量。
图1．50μL扩增体系中，以50ng人基因组DNA为模板，
对特定基因片段（170bp）进行高特异性扩增。
泳道M：DNA Ladder 2000；
泳道1，2：Taq酶1.25U；
泳道3，4：HotStart Taq酶1.25U。
- 常用反应体系（50μL）
注：Mg2+终浓度为2mM。成分 用量 5×HS Taq Buffer with Mg2+ 10μL 上游引物 0.2～1.0μM（终浓度） 下游引物 0.2～1.0μM（终浓度） dNTPs (10mM each) 1μL 模板 1～50ng（质粒）
10ng～1μg（基因组）热启动Taq DNA聚合酶(5U/μL) 0.25μL(1.25U) ddH2O 至50μL - 常用PCR循环
- 当扩增片段＜3K：
循环数 温度 时间 1 94℃ 300s 30 94℃ 20s 50～60℃ 20s 72℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温 - 当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）：
循环数 温度 时间 1 94℃ 5min 30 94℃ 5s 68℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温
- 当扩增片段＜3K：
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